英語(yǔ)孫老師
作者：梅奧醫(yī)學(xué)翻譯 | 關(guān)注：2023-05-12 14:40:53 | 關(guān)注：
公司： 北京華爾盾生物技術(shù)有限公司
行業(yè)： 制藥/生物工程
職位： 細(xì)胞培養(yǎng)員
最高學(xué)歷
學(xué)歷： 碩士
專業(yè)： 生物科學(xué)，技術(shù)
學(xué)校： 中國(guó)人民解放軍 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
自我評(píng)價(jià)
熟練掌握生物技術(shù)上游、中游實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如：基因克隆、載體構(gòu)建、基因異源表達(dá)（大腸桿菌系統(tǒng)、酵母系統(tǒng)）、基本發(fā)酵技術(shù)、產(chǎn)物純化及檢測(cè)(SDS-PAGE、Native-PAGE、Western blot、HPLC)；對(duì)上游、下游及后續(xù)實(shí)驗(yàn)有整體了解，能獨(dú)立操作分子克隆實(shí)驗(yàn)、蛋白表達(dá)及純化和鑒定；學(xué)習(xí)能力強(qiáng)，關(guān)注國(guó)內(nèi)外生物醫(yī)藥領(lǐng)域研究動(dòng)向。 熟練查閱專業(yè)文獻(xiàn)，并正確理解。能獨(dú)立設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；有一定的分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力。
外語(yǔ)：能熟練閱讀、翻譯和理解英文專業(yè)文獻(xiàn)；通過(guò)北京市碩士研究生學(xué)位統(tǒng)考(GET)，及CET-4。
計(jì)算機(jī)：熟練應(yīng)用MS OFFICE軟件及常用生物學(xué)軟件。
工作經(jīng)驗(yàn)
2006 /6--2007 /10：北京華爾盾生物技術(shù)有限公司（50-150人） [ 1年4個(gè)月]
所屬行業(yè)： 制藥/生物工程
生產(chǎn)部 細(xì)胞培養(yǎng)員
CHO細(xì)胞的傳代、培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)上清的收集。
項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)
2009 /4--2011 /4：國(guó)家自然科學(xué)基金 (No.30870050)項(xiàng)目：大腸桿菌對(duì)胸腺素α原N末端乙?；揎椀臋C(jī)理研究
項(xiàng)目描述： 一般認(rèn)為原核生物（如大腸桿菌）缺乏蛋白質(zhì)翻譯后修飾現(xiàn)象，如糖基化、乙?；?。但本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)用大腸桿菌表達(dá)的胸腺素α原有部分乙酰化修飾?，F(xiàn)已確知大腸桿菌的N-末端乙?；D(zhuǎn)移酶有RimI、RimJ和RimL，它們分別負(fù)責(zé)大腸桿菌核糖體蛋白S18 、S5和L12的N-末端乙?；揎?。本研究通過(guò)Red重組技術(shù)將大腸桿菌的三個(gè)Nα-乙酰基轉(zhuǎn)移酶基因rimI、rimJ和rimL分別敲除及組合敲除，構(gòu)建了一系列的基因缺陷株，在這些缺陷株中表達(dá)ProTα，研究RimI、RimJ和RimL對(duì)ProTα乙?；揎椀挠绊?。具文獻(xiàn)報(bào)道，蛋白質(zhì)的N-末端氨基酸序列影響其N-末端乙?；?，本研究構(gòu)建一系列ProTα N-末端氨基酸序列突變株，通過(guò)MALDI-TOF MS檢測(cè)突變株的分子量，并推斷ProTα突變株的乙?；闆r。本研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌的RimJ蛋白是ProTα的主要修飾酶，只要敲除rimJ基因，ProTα就不能乙酰化，而在大腸桿菌野生菌及rims全敲除的三缺陷菌中過(guò)表達(dá)rimJ或rimL，均能使ProTα幾乎完全乙?；?，其中過(guò)表達(dá)rimL的研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同。另外，過(guò)表達(dá)rimI抑制ProTα的乙?；剑⒕哂薪y(tǒng)計(jì)學(xué)意義；本研究發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)的N-末端氨基酸序列影響其乙酰化修飾水平，但具體機(jī)理還不清楚。我們的課題為大腸桿菌N-末端乙?；揎椦芯刻峁┝艘粋€(gè)新的模型和思路，為以后的研究奠定基礎(chǔ)，也為用基因工程法制備N-末端乙?；腡α1提供思路。
責(zé)任描述： 項(xiàng)目主要執(zhí)行人，負(fù)責(zé)文獻(xiàn)調(diào)研、課題設(shè)計(jì)、基因敲除、蛋白突變體構(gòu)建、蛋白表達(dá)純化、RP-HPLC分析、數(shù)據(jù)整理分析。
2009 /3--2011 /4：原核生物糖基工程
項(xiàng)目描述： 隨著DNA測(cè)序技術(shù)、生物信息學(xué)及分析方法的發(fā)展，越來(lái)越多的病原菌基因組測(cè)序工作及基因注釋已完成。最近，在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)了蛋白質(zhì)的糖基化修飾系統(tǒng)，最具代表性的是空腸彎曲弧菌的N-糖基化修飾系統(tǒng)、腦膜炎奈瑟球菌和綠膿桿菌的O-糖基化修飾系統(tǒng)。這些糖基化修飾系統(tǒng)能成功的轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中并且仍然獨(dú)立發(fā)揮其糖基化修飾作用。另外，寡糖轉(zhuǎn)移酶對(duì)糖底物特異性要求非常低，這使按照我們的需求來(lái)“定制糖蛋白”成為可能，即，我們可以利用符合自己需求的多糖來(lái)修飾目的蛋白，這標(biāo)志著“原核生物糖基工程”的到來(lái)，并將為利用細(xì)菌生產(chǎn)糖結(jié)合疫苗和小分子糖蛋白藥物的發(fā)展提供良好的契機(jī)。課題的研究目的就是要在大腸桿菌中建立一套糖基化修飾系統(tǒng)，本研究擬在大腸桿菌內(nèi)重建腦膜炎奈瑟球菌O-糖基化修飾系統(tǒng)，利用寡糖轉(zhuǎn)移酶對(duì)糖底物的低特異性，用多種多糖分別修飾目的蛋白。目前以宋內(nèi)氏志賀菌的O-antigen及肺炎鏈球菌的CPS作為多糖的研究模型，來(lái)修飾腦膜炎奈瑟球菌的菌毛蛋白，并得出相關(guān)結(jié)論。同時(shí)，我對(duì)原核生物糖基化研究作了較為詳細(xì)的文獻(xiàn)綜述《原核生物糖基化修飾系統(tǒng)及其應(yīng)用前景》（已接受）。
責(zé)任描述： 項(xiàng)目主要執(zhí)行人，負(fù)責(zé)文獻(xiàn)調(diào)研、課題設(shè)計(jì)、基因敲除、大片段基因克隆，表達(dá)載體構(gòu)建，產(chǎn)物檢測(cè)。